E. D. Mytsa, L.Yu. Kokaeva, S.N. Elansky
Oomycete Phytophthora ungbarnafólk (Mont) de Bary veldur seint korndrepi, hættulegum sjúkdómi í kartöflum og tómötum. Ein helsta uppspretta frumæpisins P. infestans eru þykkveggðir æxlunargerðir - oospores.
Blendingar oospores sem myndast vegna krossa á erfðafræðilega mismunandi stofnum foreldra stuðla að aukinni fjölbreytni arfgerðar í íbúum, sem leiðir til þess að aðlögun stofna að nýjum afbrigðum og beittum sveppum er hraðað.
Myndun Oospore P. infestans á þessu sviði var tekið fram í mörgum löndum heims: Rússlandi (Smirnov o.fl., 1999), Noregi (Hermansen o.fl., 2002), Svíþjóð (Strömberg o.fl., 2001), Hollandi (Kessel o.fl., 2002) o.fl. svæðum. Oospores geta lifað í meira en 2 ár í jarðvegi í lífvænlegu ástandi (Bødker o.fl., 2006) og valdið sýkingu af plöntum eftir ofurvetur (Ulanova o.fl., 2010; Lehtinen o.fl., 2002).
Fyrr var sýnt fram á að lauf plantna af mismunandi stigum kartöflubúsins hefur mismunandi mótstöðu gegn seint korndrepi; það eykst frá neðri laufunum til þeirra efri. Þessi þróun fer ekki eftir laufaldri, plöntualdri og kartöfluafbrigði (Vesper o.fl., 2003). Á sama tíma gátum við ekki fundið gögn um mismun á styrk myndunar oospore í laufum mismunandi laga af kartöflumunnum í bókmenntunum. Hins vegar, ef slíkur munur er fyrir hendi, ætti að taka tillit til hans þegar tekið er laufsýni til greiningar á myndun oospore og þegar túlkaðar eru niðurstöður annarra höfunda. Markmið þessarar vinnu var að rannsaka myndun oospores í aðskilnum laufum mismunandi laga af kartöfluplöntu, sett við sömu aðstæður í rökum hólfum.
efni og aðferðir
Við notuðum 5 einangrun P. infestans mismunandi gerðir af pörun einangruð úr sýnum sem hafa orðið fyrir áhrifum frá Moskvu, Ryazan og Leningrad svæðum. Af þeim voru valin 3 pör af stofnum af mismunandi tegundum pörunar, sem gáfu mikið af eggfrumum þegar þeir voru prófaðir í agarhafnamiðli.
Við prófun notuðum við vírusfríar kartöflur plöntur af eftirfarandi tegundum sem ræktaðar voru í gróðurhúsi (í mó undirlagi): snemma Sandrin, Zorachka, Uladar, Osiris, miðjan snemma Ilyinsky, miðju árstíð Yanka.
Einföld lauf frá mismunandi stigum kartöflujurtarinnar voru valin til greiningar. Þrjú lauf voru valin úr neðri hæðinni (4 neðri blöndur úr blöndunni), þrjú að ofan (3-4 blönduð blöð að ofan) og þrjú lauf frá miðju runna. Einföld lauf voru vigtuð, ljósmynduð á hnitapappír (til að reikna rúmmál og flatarmál) og síðan sett á hvolf á sæfðu vatni, hellt 25 ml í petrískál. Síðan var hvert lauf smitað af einum dropa af blönduðu sviflausn zoosporangia einangrunar A1 og A2 af pörun gerð. Í þremur laufum sem safnað var frá hverju stigi var notað inokulum þriggja mismunandi para einangrunar. Eitt lauf smitaðist af inoculum blöndu af einu pari einangrunar.
Til að útbúa sviflausn á zoosporangia voru einangrun af mismunandi pörunartegundum ræktuð á agarhafnamiðli í 7 daga og síðan var zoosporangia skolað af með sæfðu eimuðu vatni. Styrkur inoculum var 5-7 dýragarðar í sjónsjóni smásjárinnar við 80x stækkun. Hvert lauf smitaðist af einum dropa af blandaðri dreifu af gerð zoosporangia einangrunar A1 og A2.
Í öllum tilraunum voru notuð 3 kartöflublöð á hvert afbrigði. Eftir ræktun í 20 daga við 18 ° C var hvert lauf einsleitt í steypuhræra með 2 ml af eimuðu vatni. Úr sviflausninni sem myndaðist voru tekin 3 sýni, en úr þeim var undirbúningur fyrir smásjárgerð undirbúinn.
Í hverju afbrigði voru 180 sjónsvið skoðuð og eftir það var fjöldi óspora endurreiknaður á 1 mm2 lak yfirborð. Talninganiðurstöður fyrir hvert afbrigði voru að meðaltali.
Til að reikna út öryggisbilið (μ) fyrir marktækni 0,05 var eftirfarandi formúla notuð
þar sem s er staðalfrávik, n er fjöldi mælinga, t er t-próf fasti fyrir marktektarstig 0,05. Allir útreikningar voru gerðir í Excel (Microsoft Office pakki).
Niðurstöður og umræður
Bólusetning laufa sem safnað er úr mismunandi lögum af kartöflumunnum og sett við sömu aðstæður í rökum hólfum leiddi í ljós mun á styrkleika myndunar oospore. Í öllum afbrigðum sem rannsökuð voru myndaðist hámarksfjöldi eggfrumna við sáðingu laufa sem safnað var frá neðri og miðju þéttingu runna. Enginn marktækur munur fannst á myndun oospores í neðri og miðju laufunum.
Lágmarksfjöldi oospores myndaðist í laufum efra lagsins (mynd 1).
Í laufum neðri og miðju þrepa myndaðist hámarksfjöldi oospores í afbrigðunum Sandrin, Ilyinsky, Zorachka, Uladar og Osiris. Þeir voru myndaðir nokkuð minna ákaflega í laufi Yanka fjölbreytni. Hámarksfjöldi oospores í laufum efra lagsins kom fram í laufum Uladar fjölbreytni, þá fóru Zorachka, Osiris, Yanka, Ilyinsky, Sandrin í minnkandi röð, en ekki var allur munur tölfræðilega marktækur.
Mynd: 1. Myndun oospores í laufum mismunandi laga af kartöflumunnum. Neðri eru lauf þriggja neðri stiga runnar, þau efri eru 3-4 flókin lauf frá toppi plöntunnar, miðju eru frá miðjum runni.
Villustikur sýna öryggisbil fyrir marktækni 0,05.
Á vettvangi stuðla örloftslagsaðstæður einnig að myndun ópóra í neðri og miðri laufum runnans: meiri raki, minni sólþolun og daglegar hitasveiflur (Harrison, 1992). Efsta úða leiðir til minna skordýraeiturs í botni og miðju runna. Til að draga úr myndun oospores, ætti að nota tækni sem gerir kleift að bera sveppalyf í neðri og miðju hluta runna. Góðan árangur er hægt að fá með því að nota ókyrrðar loftúða og almenn sveppalyf sem geta dreifst út í ómeðhöndlaða hluta runna.
Þessi vinna var studd af rússnesku vísindastofnuninni (verkefni nr. 14-50-00029).
Greinin var birt í tímaritinu „Kartöfluvernd“ (nr. 2, 2015)